随着相关研究人员对生命迹象的不断研究，我们也开始动植物体内的元素进行研究，像细胞、基因以及蛋白质等都是大家研究的对象，目前我国已经在这些领域取得了显著的成就，尤其是对蛋白质的研究，使用定氮仪的发明更是加快了研究的步伐。因此, 对于蛋白质相互作用的研究就成为蛋白质组学中最主要研究内容之一,迄今已发展了包括经典的噬菌体展示技术、酵母双杂交系统以及新近发展并广泛应用的串联亲和纯化和荧光共振能量转移技术、表面等离子共振技术等多种有效的研究蛋白质间相互作用的高通量分析方法,为蛋白质组学的发展奠定了坚实的基础。

由于蛋白质间的识别与结合主要取决于局部肽段中少数几个氨基酸,所以用受体蛋白对随机肽库进行亲和筛选,就能得到之结合的短肽序列,根据此短肽的序列,就可以得到与目的蛋白相互作用所依赖的氨基酸残基,从而可以进一步研究蛋白质之间的分子识别,酶与底物的结合等等,突破了传统研究蛋白质相互作用时需对其结构详尽了解的限制。近年来质谱技术发展迅速,其功能强大且灵敏度高,常用来鉴定相互作用的蛋白质复合体或复合体亚基,但通常难以获得足够量纯化的蛋白质复合体,成为质谱在这方面应用的一个限速步骤。

表面等离子共振是一种物理光学现象,当一束平面单色偏振光以一定角度入射到镀在玻璃表面的薄层金属膜上发生全反射时,若入射光的波向量与金属膜内表面电子的振荡频率相一致,光线即被耦合入金属膜引发电子共振,即表面等离子共振。由于共振的产生,导致反射光的强度在某一特定的角度大大减弱,反射光消失的角度称为共振角,共振角随金属表面折射率的变化而变化,而折射率的变化又与金属表面结合物的分子质量成正比。由此,在20世纪90年代发展了应用SPR原理检测生物传感芯片上的配位体与分析物作用的一种新技术表面等离子共振。在该技术中,待测生物分子被固化在生物传感芯片上,使另一种被测分子的溶液流过表面,如二者发生相互作用, 就会引起芯片表面折射率的变化,从而导致共振角的改变,通过检测该共振角的变化,就可实时监测分子间的相互作用。

机体细胞内蛋白质之间相互交叉作用形成网络,构成各项生理活动的基础。因此了解、阐明蛋白质之间相互作用的机制意义重大。从近期国际上蛋白质研究的发展动向可以看出,揭示蛋白质之间的相互作用关系,建立相互作用的网络图,已成为蛋白质研究领域中的热点,覆盖了从微生物到动植物的各个领域。出于研究的需要,各种新的研究技术不断涌现,尤其随着生物信息学的出现,多种方法技术并存,相互间交叉互补,已愈来愈成为研究蛋白质相互作用研究方法的主要特点,对于准确理解蛋白质功能、揭开各种细胞活动的奥秘具有重大的意义,势必会引导蛋白质组学的发展进入一个全盛时期。中国粮油仪器网  http://www.grainyq.com/