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定氮仪蒸馏器测定蛋白质含量的蒸馏过程

来源: http://www.grainyq.com/  类别:实用技术  更新时间:2015-03-13  阅读
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定氮仪蒸馏器我们一般也简单的称为蒸馏器,是一种可以单独使用对样品进行蒸馏或者跟消化炉一起使用用来用来测定蛋白质的氮含量的设备。
 
凯式定氮法测定样品中蛋白质含量一般可以分为四个步骤:消化、蒸馏、吸收、滴定。消化样品需要用到消化炉,蒸馏则是运用定氮仪蒸馏器进行蒸馏。
 
凯式定氮法测定蛋白质含量的蒸馏过程如下:
 
1.洗涤蒸馏器:用水洗涤干净定氮仪蒸馏器,在蒸汽发生器中加入用几滴硫酸酸化的蒸馏水和几滴甲基红指示剂,用这样的水蒸气洗涤凯氏定氮仪。约15分钟后,在冷凝器下端倾斜放好装有硼酸-指示剂的锥形瓶,继续蒸汽洗涤2分钟,观察锥形瓶内的溶液是否变色,如不变色则证明蒸馏装置内部已洗涤干净。移走锥形瓶,停止加热,打开夹子。
 
2.蒸馏器蒸馏过程:取下棒状玻塞,用吸管吸取消化液,细心地插到反应室小玻璃杯的下方,塞紧棒状玻塞。将一个含有硼酸和指示剂的锥形瓶放在冷凝器下方,使冷凝器下端浸没在液体内。取30%的氢氧化钠溶液10ml放入小玻璃杯中,轻提棒状玻璃塞使之流入反应室(为了防止冷凝管倒吸,液体流入反应室必须缓慢)。尚未完全流入时,将玻璃塞盖紧,向玻璃杯中加入蒸馏水约5ml。再轻提玻璃塞,使一半蒸馏水慢慢流入反应室,一半留在玻璃杯中作水封。加热水蒸汽发生器,沸腾后夹紧夹子,开始蒸馏。氨气进入锥形瓶,瓶中的酸溶液由紫色变成绿色。变色时起记时,再蒸馏5分钟。移动锥形瓶,使硼酸液面离开冷凝管约1 厘米,并用少量蒸馏水洗涤冷凝管口外面,继续蒸馏1分钟,移开锥形瓶,用表面皿覆盖锥形瓶。蒸馏完毕后,须将反应室洗涤干净,再继续下一个蒸馏操作。待样品和对照均蒸馏完毕后,同时进行滴定。
 
蒸馏是滴定的前提,只有将样品中的含氮物质完全蒸馏出来,才能进行滴定,如果定氮仪蒸馏器没有将含有的化学物质完全蒸馏吸收,那么测出的蛋白质结果将有偏差。
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