蛋白质是人体中一个重要的组成部分，对人体的监健康有着重要的影响，同样在其他生物跟动物之中也是如此，所以蛋白质含量的测定是一个非常重要的课题，今天我们来说说用自动型凯氏定氮仪测定蛋白质含量的试验全过程。

　　1 预消化及温度控制因素

　　1.1预消化

　　在消煮前,如能对样品进行预消化,则消煮时间可缩短。所谓预消化,就是提前ld将样品称好,放人开氏管中,加上催化剂及消煮液,反应12h,这样可避免由于喷溅损失而给测定结果带来的影响,这一点对含纤维素及脂肪高的样品尤为重要,这类样品的消煮液也要酌情多加。

　　1.2温度的有效控制

　　在刚开始消煮时,一定要低温,并在刚有发泡沸腾时就将开氏管从电炉上取下,让其沸腾停止后再放上电炉,这样不易因沸腾剧烈而导致开氏管壁粘上样品,待高温时形成炭粒而无法进人开氏管瓶底部消煮,使蛋白质损失。在消煮中,当开氏管内的样品由黑色变为褐色时应将炉温调低,或者将开氏管移到电炉子的边缘,以防因炉温太高而使小漏斗被气体顶掉,此点尤其在消煮土壤样品时更应注意。

　　2 蒸馏中碱液皿的适度控制

　　在蒸馏时应根据加人消煮酸的多少来确定加人NaoH溶液量。碱液加少了,氮素没有全部从消煮液中转化出来,造成测定结果偏低;而碱液加人太多,又造成浪费。通过多年测试分析,我们认为加碱量是加酸量的5一6倍,碱的浓度为40%(WlW)。加碱量适中,在开始蒸馏后,消煮液呈黄褐色,但这个范围很窄。在加人碱量不足时,溶液呈白蓝色,太多时又呈蓝色。

　　3 硫酸滴定液的浓度与样品含氮且的关系

　　选用H2sO4标准溶液滴定蒸馏液时,其浓度的大小,取决于样品含氮量的高低。两者最终以适度的滴定体积来决定。适度的耗酸量控制在5.00耐左右,滴定体积太小,则误差几率增大,滴定体积太大,又浪费时间,降低工作效率,尤其是在大批量测定时更为突出。

　　4 体系的空白

　　每批次测定时都应有空白样,用空白样的消耗量来监测批次间的情况,一般空白消耗量在0.30时左右。如果硼酸接收液增加,则空白值也会有一些升高。如果空白值太高、太低,都要查找原因,否则会造成蛋白质测定结果的正负误差。